
做杆状病毒的人都有一个共同痛点:空斑实验(plaque assay)要养 5–7 天,靠肉眼数斑,操作者之间差异大,还常常赶不上工艺决策的节奏。Exp-Sys 给出的解法是把"数斑"换成"数流式"。
一、原理:盯住 gp64
gp64 是出芽型杆状病毒(budded virus)包膜上的主要糖蛋白,是病毒进入培养的昆虫宿主细胞所必需的,也是细胞间传播的关键。感染后 6 小时内,被感染的昆虫细胞表面就会表达 gp64。
Exp-Sys 的 gp64-PE 是 PE 直标的小鼠抗杆状病毒单克隆抗体:
参数 说明
克隆号 AcV1
抗体类型 Mouse IgG2A
储存缓冲液 PBS + 0.05% BSA + 0.09% 叠氮钠
规格 100 µL / 200 µL
保存 2–8 ℃ 避光,效期自生产日起 2 年
二、滴度检测流程(<24 小时)
用病毒做系列对数稀释接种培养物;
接种后 18–20 小时染色;
流式细胞术统计感染细胞 / 未感染细胞比例;
统计稀释系列中感染细胞百分比,反推感染性滴度。
Exp-Sys 的杆状病毒滴度检测试剂盒(Baculovirus Titering Kit)内含 gp64-PE 抗体与已知滴度的对照病毒(BestBac 2.0 与空 pVL1393 共转染、在 Sf9 中制备)。
三、为什么它比"快"更重要
测的是感染性病毒:颗粒计数仪和 qPCR 确实也快,但给出的是物理颗粒数或基因组拷贝数,不是真正的感染性滴度;
体系更贴合实际生产:采用悬浮培养方法学,接近真实表达培养的条件,得到的滴度更具参考价值;
消除人为误差:流式数据采集替代人工计数斑块;
可高通量:只要能读 96 孔板的流式细胞仪,就能把它接入高通量流程。
四、一支抗体还能当三支用
gp64-PE 抗体可单独使用,用于:
杆状病毒滴度测定
感染动力学监测(感染进程随时间的变化)
蛋白表达筛选
对需要频繁调整 MOI、优化感染时点的工艺开发岗位,这是把"等一周"压缩到"第二天出结果"的工具。
科研级试剂仅供科研使用,不得直接用于人体治疗或诊断。