
人外周血里真正的树突状细胞只占白细胞的千分之几,流式圈门稍有不慎,圈进来的就是单细胞或者 B 细胞。2014 年以来,国际免疫学界把人 DC 统一命名为 pDC、cDC1、cDC2 三大谱系,加上朗格汉斯细胞与单核来源 DC 两个「编外」群体。这篇文章把每个亚群的标志物、对应的 Dendritics 克隆号和圈门要点一次讲清。
(一)三大谱系的表型骨架
亚群 | 经典标志物 | 扩展标志物 | 核心功能 |
pDC (浆细胞样 DC ) | CD303/BDCA-2 、 CD304/BDCA-4 、 CD123 | ILT3 、 ILT7 、 CD4 | 病毒应答中大量产生 I 型干扰素 |
cDC1 | CD141/BDCA-3 、 CLEC9A | XCR1 、 CADM1 、 BTLA 、 CD26 | 交叉递呈抗原给 CD8⁺ T 细胞 |
cDC2 | CD1c/BDCA-1 | CD2 、 FcεR1α 、 SIRPα 、 CD11b | 激活 CD4⁺ T 细胞, Th1/Th2/Th17 极化 |
朗格汉斯细胞 | CD207/Langerin 、 CD1a | E-cadherin 、 EpCAM | 皮肤表皮抗原转运 |
mo-DC (单核来源) | CD11c 、 CD1c 、 CD1a | DC-SIGN/CD209 、 CD206 | 炎症组织中的抗原递呈 |
三个值得注意的量级概念:cDC1 在外周血白细胞中仅约 0.02%,cDC2 约 0.3%,pDC 约占 PBMC 的 0.2%—0.5%。这意味着做血液 DC 分型时,进样量与抗体亮度直接决定数据质量。
(二)Dendritics 克隆号面板:一管血能画多深
2021 年《Cells》上一项人炎性单核来源 DC 表型研究,用一整套 Dendritics 抗体画出了 DC 谱系的完整地图,也公开了各标志物的克隆号。这张表可以直接当作建面板的选型清单:
标志物 | 克隆号 | 常用偶联 | 用途提示 |
CD303/BDCA-2 ( pDC ) | 104C12 | APC / AF647 | pDC 圈门核心标志物 |
CD304/BDCA-4 ( pDC ) | 211H6 | APC / AF647 | 与 CD303 联用确认 pDC |
CD123 ( pDC ) | 107D2 | APC / AF647 | 注意单核细胞低表达 |
CD207/Langerin ( LC ) | 808E10 | AF647 / 冰冻切片 | 朗格汉斯细胞与皮肤 cDC1 |
CD1a ( LC / mo-DC ) | 214A9 | AF647 | 体外诱导 mo-DC 质控 |
CD208/DC-LAMP (成熟) | 109G3 | AF647 | 成熟 DC 特异性标志 |
CD206 (甘露糖受体) | 122D2 | AF647 | 未成熟 DC 与巨噬细胞区分 |
CD209/DC-SIGN | 102F10.04 / 111H2.02 | AF488 / Biotin | mo-DC 与病原识别研究 |
TLR2 / TLR3 / TLR7 / TLR8 | 1308F10 / 1213F10 / 66H3 / 112H7 | AF647 | 天然免疫识别面板 |
同型对照 | Mab13 (抗 Bet v 1 ) | — | MFI 扣背景专用 |
(三)建面板的四个实操要点
1. 先排 Lin⁻,再排亚群。Lin(CD3/CD14/CD19/CD20/CD56)排除 T、B、NK、单核之后,剩下的 HLA-DR⁺ 细胞才是 DC 门;
2. 亮度弱的标志物给红光通道。cDC1 占比极低,CD141 建议配 PE 或 APC 等高亮度荧光素,AF488 留给高表达标志物;
3. 用 MFI 而不只是阳性率。DC 表面受体多为连续低表达,文献通行做法是「特异性 MFI = 染色 MFI − 同型 MFI」,Dendritics 配套的 Mab13 同型对照正是为此设计;
4. 组织样本别硬套血液标志物。BDCA-1/CD141 在组织与培养体系中会被诱导表达,Collin 2020 建议加 CD2、FcεR1α(cDC2)或 CLEC9A、CADM1(cDC1)等跨物种稳定标志物复核。