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人外周血里真正的树突状细胞只占白细胞的千分之几,流式圈门稍有不慎,圈进来的就是单细胞或者 B 细胞。2014 年以来,国际免疫学界把人 DC 统一命名为 pDC、cDC1、cDC2 三大谱系,加上朗格汉斯细胞与单核来源 DC 两个「编外」群体。这篇文章把每个亚群的标志物、对应的 Dendritics 克隆号和圈门要点一次讲清。

(一)三大谱系的表型骨架

亚群

经典标志物

扩展标志物

核心功能

pDC (浆细胞样 DC )

CD303/BDCA-2 、 CD304/BDCA-4 、 CD123

ILT3 、 ILT7 、 CD4

病毒应答中大量产生 I 型干扰素

cDC1

CD141/BDCA-3 、 CLEC9A

XCR1 、 CADM1 、 BTLA 、 CD26

交叉递呈抗原给 CD8⁺ T 细胞

cDC2

CD1c/BDCA-1

CD2 、 FcεR1α 、 SIRPα 、 CD11b

激活 CD4⁺ T 细胞, Th1/Th2/Th17 极化

朗格汉斯细胞

CD207/Langerin 、 CD1a

E-cadherin 、 EpCAM

皮肤表皮抗原转运

mo-DC (单核来源)

CD11c 、 CD1c 、 CD1a

DC-SIGN/CD209 、 CD206

炎症组织中的抗原递呈

三个值得注意的量级概念:cDC1 在外周血白细胞中仅约 0.02%,cDC2 约 0.3%,pDC 约占 PBMC 的 0.2%—0.5%。这意味着做血液 DC 分型时,进样量与抗体亮度直接决定数据质量。

(二)Dendritics 克隆号面板:一管血能画多深

2021 年《Cells》上一项人炎性单核来源 DC 表型研究,用一整套 Dendritics 抗体画出了 DC 谱系的完整地图,也公开了各标志物的克隆号。这张表可以直接当作建面板的选型清单:

标志物

克隆号

常用偶联

用途提示

CD303/BDCA-2 ( pDC )

104C12

APC / AF647

pDC 圈门核心标志物

CD304/BDCA-4 ( pDC )

211H6

APC / AF647

与 CD303 联用确认 pDC

CD123 ( pDC )

107D2

APC / AF647

注意单核细胞低表达

CD207/Langerin ( LC )

808E10

AF647 / 冰冻切片

朗格汉斯细胞与皮肤 cDC1

CD1a ( LC / mo-DC )

214A9

AF647

体外诱导 mo-DC 质控

CD208/DC-LAMP (成熟)

109G3

AF647

成熟 DC 特异性标志

CD206 (甘露糖受体)

122D2

AF647

未成熟 DC 与巨噬细胞区分

CD209/DC-SIGN

102F10.04 / 111H2.02

AF488 / Biotin

mo-DC 与病原识别研究

TLR2 / TLR3 / TLR7 / TLR8

1308F10 / 1213F10 / 66H3 / 112H7

AF647

天然免疫识别面板

同型对照

Mab13 (抗 Bet v 1 )

—

MFI 扣背景专用

(三)建面板的四个实操要点

1.  先排 Lin⁻,再排亚群。Lin(CD3/CD14/CD19/CD20/CD56)排除 T、B、NK、单核之后,剩下的 HLA-DR⁺ 细胞才是 DC 门;

2.  亮度弱的标志物给红光通道。cDC1 占比极低,CD141 建议配 PE 或 APC 等高亮度荧光素,AF488 留给高表达标志物;

3.  用 MFI 而不只是阳性率。DC 表面受体多为连续低表达,文献通行做法是「特异性 MFI = 染色 MFI − 同型 MFI」,Dendritics 配套的 Mab13 同型对照正是为此设计;

4.  组织样本别硬套血液标志物。BDCA-1/CD141 在组织与培养体系中会被诱导表达,Collin 2020 建议加 CD2、FcεR1α(cDC2)或 CLEC9A、CADM1(cDC1)等跨物种稳定标志物复核。