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浆细胞样树突状细胞(pDC)是免疫系统的「干扰素工厂」——遇到病毒核酸,一个 pDC 能在短时间内产出海量 I 型干扰素。这个特性让它成为红斑狼疮、银屑病、抗病毒免疫和肿瘤微环境研究的热门靶细胞,但 pDC 在血里占比低、标志物与其他细胞重叠,工具不对就寸步难行。Dendritics 在这个细分方向恰恰是最全的。

(一)鼠源 pDC:一株 120G8 走天下

做小鼠 pDC,绕不开 120G8 这株大鼠单抗(货号 DDX0390,大鼠 IgG2a)。它的价值在于「既能染,也能耗」:特异性标记 B220⁺Ly6C⁺CD11c^low 的小鼠 pDC 群体,用于 FACS 与免疫组化定位(pDC 定位于脾脏、淋巴结与派氏集合淋巴结的 T 细胞区);体内注射后可选择性耗除该群细胞,处理小鼠对 CpG 刺激的 IFN-α 应答大幅下降(Asselin-Paturel 等,J Immunol 2003;172:6466;Blasius 等,J Immunol 2006;177:3260)。

这意味着两个经典实验设计可以直接落地:耗除验证依赖性——想知道某个抗病毒或自身免疫表型是否依赖 pDC,打 120G8 对照即可;组织定位——冰冻切片上直接看 pDC 在淋巴器官与炎症组织中的分布。

(二)人源 pDC:从圈门到信号通路的全套克隆

层面

标志物

克隆号

研究用途

圈门与鉴定

CD303/BDCA-2

104C12

pDC 特异性 C 型凝集素,核心圈门标志

CD304/BDCA-4

211H6

NRP-1 ,与 CD303 联用互证

CD123 ( IL-3Rα )

107D2

高表达于 pDC ,注意与嗜碱粒细胞区分

核酸识别

TLR7

66H3

单链 RNA 感受器,抗病毒应答核心

TLR8

112H7

与 TLR7 互补,配体特异性研究

功能状态

CD80 / CD40

Mab104 / G28-5

成熟与共刺激能力评估

(三)三个容易踩的坑

1.  pDC 门里混着前体细胞。2020 年的统一命名综述(Collin 等)指出,传统 pDC 门内混有同样表达 CD123 与 CD303 的 cDC 前体(pre-DC),严格的谱系研究建议加 AXL、Siglec-6 等 pre-DC 标志物分闸;

2.  CD123 不是 pDC 专属。嗜碱粒细胞与部分单核细胞也表达 CD123,必须与 CD303/CD304 联合设门;

3.  TLR 是胞内受体。TLR7/TLR8 染色需要固定透膜流程,别按表面染色方案操作。

(四)典型课题怎么搭工具

● 红斑狼疮 / 银屑病:人外周血 pDC 计数与活化状态(CD303+CD304+CD123+ 面板 + CD80 成熟标志)+ IFN-α 通路读出;

● 抗病毒免疫(鼠模型):120G8 体内耗除 → CpG / 病毒攻击 → IFN-α 与病毒载量对比;

● 肿瘤微环境:肿瘤浸润 pDC 的免疫组化定位(120G8 适用于鼠源组织;人样本用 CD303/CD304 石蜡验证克隆),评估 pDC 浸润与预后关联。