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树突细胞研究做到临床样本这一步,最大的落差是:流式好做的外周血标本没了,手里是石蜡块和冰冻切片。C 型凝集素受体(CLR)家族既是 DC 的「病原感受器」,又是分型标志物,Dendritics 恰好把这个家族做成了目录里最厚的一块。这篇文章按「受体 → 克隆 → 应用」的顺序,把选型讲透。

(一)四个主力受体,各管一段

受体

克隆号(货号示例)

生物学角色

应用与注意

DC-SIGN / CD209

102F10.04 ( DDX0205A488 , AF488 ); 111H2.02 ( DDX0209B , Biotin ;另有 AF488/AF647 与无叠氮 / 无 BSA 版 DDX0209 )

识别多种病原(含 HIV gp120 结合),兼具病原识别与细胞黏附双重功能

流式推荐 1:10—1:1000 ; IHC 推荐 1:10—1:500 ; mo-DC 与巨噬细胞研究常用

MGL / CLEC10A / CD301

125A10.03 ( DDX0010P-100 ,纯化, 0.5 mg/ml )

识别 GalNAc 糖基化结构,肿瘤糖基化研究热点

WB 1:100—1:2000 、 IP 1:10—1:500 、冰冻切片 IHC 、流式;有功能学验证: 37 ℃ 结合后诱导受体内容( Valladeau 2010 )

Langerin / CD207

808E10

朗格汉斯细胞标志, Birbeck 颗粒形成受体

冰冻切片与流式;皮肤免疫与朗格汉斯细胞组织细胞增生症研究

DC-LAMP / CD208

109G3

成熟 DC 溶酶体相关膜蛋白,成熟特异性标志

区分 immature / mature DC 的金标准之一

同面板里还有两个常被一起使用的 CLR:甘露糖受体 CD206(克隆 122D2)与 Dectin-1/CD367(克隆 111F8),前者标记甘露糖受体阳性 APC,后者是 β-葡聚糖受体,真菌免疫研究中几乎必配。

(二)按样本类型选克隆:一张决策表

你的样本

推荐路径

选型要点

临床石蜡存档样本( FFPE )

IHC-P

优先选有石蜡验证注释的克隆; DC-SIGN 生物素版( 111H2.02 )适配经典 SP 检测体系;注意内源性生物素封闭

冰冻组织 / 皮肤样本

IHC-Fr + 双标

Langerin ( 808E10 ) + CD1a ( 214A9 )双标定位朗格汉斯细胞; MGL 冰冻切片验证完整

外周血 / 细胞悬液

多色流式

AF488 版 DC-SIGN ( DDX0205A488 )流式稀释 1:10—1:1000 ;配 Mab13 同型做 MFI 扣减

功能机制实验

功能级抗体

MGL ( 125A10.03 )受体内容实验有发表数据支撑;需要无叠氮 / 无 BSA 形态时选 DDX0209 系列

(三)两个性价比判断

● 别用流式抗体去切石蜡。很多 DC 抗体只验证了部分应用,选型时先看厂商的应用标注(FACS / IHC-P / IHC-Fr / Func),拿未验证的应用硬做,失败率极高;

● 无叠氮形态是做功能的前提。叠氮钠抑制细胞代谢,任何涉及活细胞结合、内容或刺激的实验,都要选无叠氮/无 BSA 版本(如 DDX0209),这是最容易踩的隐形坑。

一句话收束:血液样本看第二篇的 BDCA 面板,临床切片看这一篇的 CLR 选型,两套面板合起来,就是 Dendritics 在 DC 研究里的完整工具地图。