
细胞凋亡贯穿药物筛选、肿瘤研究与毒理评价,但"凋亡"不是单一事件,而是有序推进的过程——选检测方法,本质是选观察节点。
早期凋亡看膜外翻:Annexin V/PI 双染是金标准流程。Annexin V 结合外翻到膜外的磷脂酰丝氨酸,PI 区分膜完整性,流式上机即可把活细胞、早期凋亡、晚期凋亡/坏死分开。要点是贴壁细胞消化时避免过度胰酶作用造成假阳性,双染必须设单染对照。
执行阶段看 Caspase:Caspase-3/8/9 底物裂解检测反映凋亡执行酶的激活,适合验证药物作用通路,常与 Western Blot 检测切割型 Caspase 配合使用。
线粒体通路看膜电位:JC-1 等电压敏感染料通过聚合体/单体荧光比例变化反映线粒体膜电位崩解,适合研究线粒体依赖性凋亡通路,但染料浓度与孵育时间需严格优化,否则比例失真。
三条路线组合使用(活力—凋亡—通路),可以构成完整的检测矩阵。相关试剂盒与抗体货号均可在站内查询,需要实验方案建议可联系技术支持。