
2015 年前后,"抗体验证"问题被国际学术界集中讨论:同一靶点、同一名称的抗体,不同厂家甚至不同批次之间性能差异巨大,是造成实验不可重复的重要原因之一。十年过去,主流厂商的验证意识明显提升,但作为使用者,下单前核对验证信息仍是必要功课。
第一,看应用验证。说明书标注 WB、IHC、IF、Flow 各应用的验证状态,注意"tested application"与"predicted"的区别——前者是实验证实,后者只是序列推测。
第二,看特异性验证方式。更有说服力的证据包括:敲低/敲除(siRNA/KO)样本中条带消失或减弱、过表达样本中条带增强、多肽竞争实验等。
第三,看批次一致性。多克隆抗体天然存在批次间差异,对定量实验敏感的课题,优先考虑重组单抗形式的产品线(如 Immunotag™ 的重组单抗产品),批次一致性更好。
第四,看物种反应性依据。"predicted to work"不等于验证过。样本为非模式物种时,务必先与厂家或代理确认序列同源性数据。
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